Complementary and Alternative Healing University  |
| 雷 公 藤 内 酯 醇 抗 移 植 排 斥 反 应 的 研 究 邹 小 明 方 向 东 1 罗 爱 武 2 李 全 启 李 金 声 王 小 宁 1 关 键 词 雷 公 藤 内 酯 醇 心 肌 移 植 排 斥 反 应 免 疫 抑 制 摘 要 应 用 小 鼠 同 种 異 位 心 肌 移 植 模 型 ， 证 实 雷 公 藤 内 酯 醇 (triptolide, Tri)可 明 显 延 长 移 植 心 的 存 活 期 。 对 T淋 巴 细 胞 增 殖 活 性 影 响 的 实 验 结 果 表 明 ， Tri对 Con A激 活 的 淋 巴 细 胞 转 化 及 特 異 性 抗 原 激 活 的 混 合 淋 巴 细 胞 反 应 均 有 明 显 地 抑 制 作 用 ； 同 时 ， Tri对 Con A诱 导 的 IL- 2產 生 无 影 响 ， 但 对 IL- 2受 体 的 表 达 有 明 显 地 抑 制 作 用 。 中 国 图 书 资 料 分 类 号 617 Effect of triptolide on cardiac allograft survival in mice Keywords triptolide cardiac allograft allograft rejection immunosuppression Abstract This paper was designed to evaluate the effect of triptolide(Tri) on cardiac allograft survival in mouse ear. In our studies triptolide was demonstrated to suppress the rejection of cardiac allograft in mouse ear. The effect was both dose dependent and time dependent. In addition, the studies also evaluated the effect of Tri on T lymphocyte proliferation induced by Con A or mixed lymphocyte reaction (MLR) in vitro. The results showed that Tri notably inhibited T lymphocyte transformation(LT) at 0.04～ 10 μ g/L and MLR at 0.2～ 10 μg/L. All these inhibitory effects were time dependent. Maximal inhibition of LT and MLR was observed when Tri was added in the first 12 h of incubation. The effect of Tri on Con A induced IL- 2 production and IL- 2R expression of lymphocytes was assayed. It was found that Tri at 0.4 μ g/L and 10 μ g/L had no significant inhibitory effect on the synthesis of IL- 2 by freshly isolated mouse splenocytes prestimulated with Con A for 24 h and 48 h. Examination of the effect of Tri on IL- 2 receptor expression indicated that Tri can reduce IL- 2R expression. These results suggested that Tri could inhibit the acute phase of transplant rejection but not to prevent allograft rejection. 本 文 利 用 小 鼠 耳 後 心 肌 移 植 模 型 及 体 外 细 胞 培 养 方 法 ， 研 究 了 Tri抗 同 种 異 体 移 植 排 斥 反 应 的 效 果 和 Tri抑 制 淋 巴 细 胞 转 化 (LT)及 混 合 淋 巴 细 胞 反 应 (MLR)的 作 用 特 点 ， 并 检 测 了 Tri对 小 鼠 脾 淋 巴 细 胞 IL- 2產 生 和 IL- 2受 体 (IL- 2R)表 达 的 影 响 ， 试 图 阐 明 Tri在 抗 移 植 排 斥过 程 中 產 生 免 疫 抑 制 作 用 的 机 制 。 1 材 料 和 方 法 1.1 材 料 供 心 小 鼠 为 C57BL/6新 生 小 鼠 ， 雌 雄 皆 用 ； 受 心 小 鼠 为 Balb/c雄 性 小 鼠 ， 6周 ～ 8周 龄， 体 重 18 g～ 22 g， 均 由 本 校 实 验 动 物 中 心 提 供 。 重 组 IL- 2(rIL- 2)标 准 品 及 IL- 2依 赖 的 细 胞 株 CTLL 2， 由 本 校 分 子 免 疫 学 研 究 所 提 供 。 抗 Tac抗 体 试 剂 盒 ， 由 第 四 军 医 大 学 免 疫 学 教 研 室 提 供 。 Tri由 福 建 省 药 物 研 究 所 提 供 。 环 孢 霉 素 A为 瑞 士 Sandoz公 司 產 品 ， RPMI-1640培 养 基 为 美 国 Gibco公 司 產 品 ， 刀 豆 蛋 白 A(Con A)为 Sigma公 司 產 品 ， 3H- TdR为 中 国 科 学 院 上 海 原 子 核 研 究 所 產 品 。 1.2 方 法 1.2.1 心 肌 移 植 模 型 的 建 立 小 鼠 耳 後 同 种 心 肌 移 植 模 型 的 建 立 及 心 电 图 测 录 方 法 等 ， 均 参 照 文 献 〔 1〕 进 行 。 1.2.2 Tri抗 心 肌 移 植 排 斥 反 应 的 实 验 ① 给 药 方 法 ： Tri用 吐 温 80和 20％ 1 2丙 二 醇 溶 解 ， 用生 理 盐 水 稀 释 至 所 需 浓 度 ， 分 別 给 予 0.02， 0.1和 0.5 mg/kg· d的 Tri。 阳 性 对 照 组 给 予 CsA 10 mg/kg.d； 阴 性 对 照 组 给 予 生 理 盐 水 0.5 ml/d， 均 为 腹 腔 注 射 (ip)。 然 後 ， 以 上 述 结 果 中 Tri的 最 佳 有 效 剂 量 ， 分 別 于 移 植 手 术 前 後 不 同 时 期 给 药 ； ② 组 织 学 观 察 ： 术 後 8 d， 各 组 取 样 本 ， 将 小 鼠 耳 廓 连 同 供 心 一 并 剪 下 ， 置 于 10％ 福 尔 马 林 中 固 定 ， 供 病 理 学 检 查 。 到 达 排 異 终 点 ， 取 各 组 样 本 做 病 理 学 检 查 。 1.2.3 Tri对 小 鼠 脾 淋 巴 细 胞 转 化 的 影 响 用 RPMI 1640完 全 培 养 液 ， 调 整 Balb/c小 鼠 脾 细 胞 悬液 至 细 胞 浓 度 为 1.0× 109/L。 于 96孔 平 底 培 养 板 中 每 孔 加 入 细 胞 悬 液 100 μ l及 Con A 80 μ l(5 mg/L)。 然 後 ， 按 以 下 两 种 方 法 加 入 Tri， 使 每 孔 的 终 体 积 为 200 μ l。 ① 加 入 不 同 浓 度 的 Tri。 根 据 Tri浓 度 的 不 同 ， 分 为 7个 实 验 组 (n=4)， 加 入 Tri的 剂 量 (μ g/L)分 別 为 0， 0.04， 0.2， 1.0， 2.0， 5.0和 10.0。 ② 于 不 同 时 间 加 入 同 一 浓 度 的 Tri(10 μ g/L)。 将 细 胞 培 养 开 始 时 加 入 的 Tri记 为 Oh， 培 养 12 h加 入 者 记 为 12 h， 依 此 类 推 。 根 据 加 入 Tri的 时 间 的 不 同 ， 即 O h， 12 h, 24 h, 36 h, 48 h和 60 h， 将 实 验 分 为 7个 组 (n=4)， 对 照 组 不 加 Tri。 然 後 ， 将 培 养 板 置 于 含 5％ CO2 及 饱 和 湿 度 条 件 下 的 培 养 箱 ， 37℃ 孵 育 72 h。 于 孵 育 终 止 前 10 h， 每 孔加 入 3H TdR 1.85× 104Bq。 继 续 培 养 10 h後 ， 用 多 头 细 胞 收 集 仪 ， 收 集 细 胞 于 玻 璃 纤 维 滤 纸 上 ， 烤 干 後 置 于 装 有 2 ml闪 烁 液 的 瓶 中 ， 用 β 液 闪 仪 计 数 。 细 胞 的 增 殖 水 平 用 cpm值 表 示 。 1.2.4 Tri对 单 向 混 合 淋 巴 细 胞 反 应 的 影 响 以 C57BL/6小 鼠 脾 细 胞 为 刺 激 细 胞 ， 经 丝 裂 霉 素 (25 mg/L)37 ℃ 处 理 45 min後 ， 洗 涤 3次 ， 调 整 细 胞 浓 度 为 1× 109/L。 Balb/c小 鼠 脾 细 胞 为 反 应 细 胞 ， 浓 度 亦 为 1× 109/L。 两 种 细 胞 各 取 100 μ l， 加 入 96孔 平 底 培 养 板 中 。 然 後 ， 参 照 1.2.3的 方 法 ， 加 入 不 同 浓 度 的 Tri和 于 不 同 时 间 加 入 Tri。 将 培 养 板 置 于 含 5％ CO2、 饱 和 湿 度 的 培 养 箱 中 ， 孵 育 120 h。 于 孵 育 终 止 前 10 h， 每 孔 加 入 3H TdR 1.85× 104Bq， 继 续 培 养 10 h後 收 集 细 胞 ， 用 β 液 闪 烁 仪 计 数 cpm值 。 1.2.5 Con A诱 导 的 小 鼠 脾 淋 巴 细 胞 IL- 2的 產 生 制 备 Balb/c小 鼠 脾 细 胞 悬 液 ， 用 完 全 培 养 液 调 整 细 胞 浓 度 为 2× 109/L。 于 24孔 培 养 板 内 每 孔 加 入 细 胞 悬 液 0.5 ml； 同 时 每 孔 加 入 Con A(终 浓 度 为 5 mg/L)及 不 同 浓 度 的 Tri: 0 μ g/L(仅 加 入 等 体 积 的 Tri 溶 解 液 ， 作 为 对 照 )， 0.4 μ g/L和 10 μ g/L(每 孔 的 终 体 积 为 1 ml)， 置 于 37℃ ， 含 5％ CO2、 饱 和 湿 度 的 培 养 箱 中 。 培 养 24 h和 48 h後 ， 收 集 上 清 ， 在 PBS(pH7.2)中 透 析 24 h， 经 0.22 μ m微 孔 滤 膜 过 滤 除 菌 後 ， 测 定 IL- 2的 活 性 。 于 96孔 培 养 板 中 ， 每 孔 加 入 100 μ l上 述 制 备 的 含 IL- 2的 上 清 。 用 无 血 清 的 基 础 培养 液 洗 涤CTLL 2细 胞 2次 ， 用 RPMI 1640培 养 液 调 整 细 胞 浓 度 为 1× 109/L。 每 孔 各 加 入 100 μ l细 胞 悬 液 ， 培 养 24 h。 于 终 止 培 养 前 6 h， 加 入 3H TdR(1.85× 104Bq/孔 )， 继 续 培 养 6 h後 收 集 细 胞 ， 用 β 液 体 闪 烁 仪 (LS9800型 ， 美 国 Beckman)计 数 cpm值 ； 并 以 参 比 IL- 2标 准 品 ， 确 定 待 测 样 品 中 IL- 2的 活 性 。 1.2.6 Tri对 小 鼠 脾 淋 巴 细 胞 IL- 2R表 达 的 影 响 IL- 2R表 达 的 诱 导 ： 取 新 鲜 制 备 的 Balb/c小 鼠 脾 细 胞 悬 液 0.5 ml（ 2× 109/L)， 加 入 24孔 培 养 板 中 ， 同 时 每 孔 加 入 Con A(5 mg/L)及 不 同 浓 度 (0 μ g/L， 0.4 μ g/L， 2 μ g/L和 10 μ g/L)的 Tri， 使 每 孔 终 体 积 为 1 ml。 于 37℃ 培 养 48 h後 取 出 ， 用 完 全 培 养 液 将 细 胞 洗 涤 3次 。 检 测 方 法 ： ① 用 APAAP桥 联 酶 标 法 (直 接 法 )， 测 定 IL- 2R的 表 达 。 具 体 步 骤 是 ： 将 悬 浮 于 完 全 培 养 液 中 的 细 胞 涂 片 ， 用 预 冷 的 丙 酮 固 定 10 min。 自 然 干 燥 後 ， 依 次 滴 加 入 大 鼠 抗 小 鼠 Tac抗 体 (一 抗 )、 羊 抗 大 鼠 Ig(二 抗 )及 APAAP复 合 物 ， 每 次 滴 加 抗 体 後 ， 置 湿 盒 内 室 温 反 应 30 min， 再 以 0.01 mol/L PBS(pH7.2)洗 涤 3次 。 然 後 加 底 物 显 色 ， 苏 木 精 衬 染 ， 甘 油 明 胶 封 片 。 以 双 盲 法 镜 下 数 200个 有 核 细 胞 ， 胞 膜 有 红 色 标 记 物 着 染 的 细 胞 ， 即 为 Tac阳 性 的 细 胞 (IL- 2R＋ 细 胞 )， 并 计 算 阳 性 率 。 ② Tri处 理 的 小 鼠 脾 细 胞 对 rIL- 2的 反 应 性 (为 上 述 方 法 的 间 接 法 )。 即用 完 全 培 养 液 将 各 培 养 孔 中 的 细 胞 洗 涤 3次 後 ， 每 孔 加 入 rIL- 2(终 浓度 为 2× 104U/L)， 继 续培 养 24 h。 于 终 止 培 养 前 6 h， 每 孔 加 入 3H TdR(1.85× 104Bq/孔 )， 继 续 培 养 6 h後 收 集 细 胞 ， 用 β 液 闪 烁 仪 计 数 cpm值 。 1.2.7 统 计 学 分 析 本 实 验 所 获 数 据 以 ━ ± SD表 示 ； 配 伍 组 设 计 的 多 个 样 本 平 均 数 的 比 较， 采 用 双 因 素 方 差 分 析 ， 其 中 两 两 比 较 采 用 SNK－ q检 验 。 2 结 果 2.1 Tri对 小 鼠 同 种 心 肌 移 植 物 存 活 的 影 响 给 予 0.1 mg， 0.5 mg Tri或 10 mg CsA等 的 实 验 组 ， 移 植 心 肌 的 存 活 时 间 均 明 显 延 长 ， 且 较 阴 性 对 照 组 有 显 著 差 異 (P 0.01)。 给 予 0.02 mg Tri的 实 验 组 ， 移 植 心 肌 的 存 活 期 没 有 明 显 延 长 (P 0.05)。 给 予 0.5 mg Tri的 实 验 组 与 给 予 10 mg CsA的 实 验 组 ， 对 移 植 心 肌 存 活 期 的 延 长作 用 相 似 (P 0.05)(图 1)。 2.2 不 同 时 间 给 予 Tri对 移 植 心 肌 存 活 的 影 响 于 不 同 时 间 给 予 Tri(0.5 mg/kg· d)， 术 前 8 d至 手 术 当 日 或 术 前 4 d至 术 後 4 d给 药 ， 移 植 心 肌 的 存 活 期 无 明 显 延 长 (P 0.05)； 而 手 术 0 d至 术 後 8 d或 术 後 8 d至 16 d连 续 给 药 ， 移 植 心 肌 的 存 活 期 均 显 著 延 长 (P 0.01)(图 2)。 2.3 组 织 学 检 查 结 果 移 植 术 後 8 d， 对 照 组 及 给 予 0.02 mg/kg· d Tri的 实 验 组 ， 移 植 的 心 肌 细 胞 间 质 及 血 管 周 围 均 有 大 量 淋 巴 细 胞 浸 润 ， 心 肌 纤 维 断 裂 。 而 给 予 0.1 mg/kg· d， 0.5 mg/kg· d Tri或 10 mg/kg· d CsA的 实 验 组 ， 心 肌 细 胞 间 质及 血 管 周 围 淋 巴 细 胞 渗 出 均 明 显 减 少 ， 且 无 明 显 的 肌 纤 维 断 裂 现 象 。 对 照 组 及 给 予 0.1mg/kg· d， 0.5 mg/kg· d Tri， 及 给 予 10 mg/kg· d CsA的 实 验 组 ， 在 术 後 22 d(排 異 终 点 )的病 理 改 变 相 似 ， 心 肌 细 胞 间 质 及 血 管 周 围 均 有 大 量 淋 巴 细 胞 浸 润 及 肌 纤 维 断 裂 现 象 。 2.4 不 同 浓 度 的 Tri对 LT的 影 响 将 7种 不 同 浓 度 的 Tri与 小 鼠 脾 淋 巴 细 胞 共 育 72 h後 ， 发 现 Tri对 LT有 明 显 的 抑 制 作 用 ， 与 不 加 Tri的 对 照 组 相 比 较 差 異 显 著 (P 0.01)。 而 且 10 μ g/L Tri组 与 2 μ g/L Tri组 相 比 较 ， 差 異 也 有 显 著 性 (P 0.01)， 表 明 随 着 Tri浓 度 的 增 加 ， 其 抑 制 LT的 作 用 逐 渐 增 强 (图 3， 见 第 Ⅴ 页 )。 2.5 不 同 时 间 给 予 Tri对 LT的 影 响 分 別 于 不 同 时 间 给 予 Tri(1 μ g/L)的 结 果 显 示 ， 0 h、 12 h和 36 h给 药 的 各 组 ， LT均 有 明 显 的 抑 制 ， 与 对 照 组 比 较 差 異 显 著 (P 0.01)。 36 h给 药 组 与 对 照 组 相 比 较 ， LT亦 有 明 显 抑 制 (P 0.05)； 而 48 h、 60 h给 药 组 与 12 h给 药 组 相 比 较 ， Tri对 LT的 抑 制 作 用 明 显 减 弱 (P 0.01)(图 4， 见 第 Ⅴ 页 )。 2.6 不 同 浓 度 的 Tri对 MLR的 影 响 观 察 了 7种 不 同 浓 度 的 Tri对 MLR的 影 响 。 结 果 显 示 ， 除 0.04μ g/L Tri对 MLR无 明 显 抑 制 作 用 外 (P 0.05)， 其 余 5组 均 可 明 显 抑 制 MLR， 与 对 照 组 相 比 较 ， 差 異 显 著 (P 0.01)(图 5， 见 第 Ⅴ 页 )。 2.7 不 同 时 间 给 予 Tri对 MLR的 影 响 0 h,12 h和 24 h给 药 的 各 组 ， 对 MLR有 明 显 地 抑 制 作 用 ， 较对 照 组 差 異 显 著 (P 0.01)。 36 h给 药 组 与 对 照 组 相 比 较 ， MLR亦 有 明 显 地 抑 制 (P 0.05)； 而 48 h和 60 h给 药 组 与 对 照 组 相 比 较 差 異 不 大 (P 0.05)。 24 h和 36 h给 药 组 的 抑 制 作 用 较 12 h给 药 组 明 显 减 弱 (P 0.01)(图 6， 见 第 Ⅴ 页 )。 2.8 Tri对 Con A诱 导 的 IL－ 2產 生 的 影 响 将 3种 不 同 浓 度 的 Tri与 5 mg/L的 Con A和 脾 淋 巴 细 胞共 育 24 h和 48 h後 ， 各 组 IL- 2的 活 性 无 显 著 差 異 (P 0.05)。 2.9 Tri对 小 鼠 脾 淋 巴 细 胞 IL- 2R表 达 的 影 响 2.0 μ g/L和 10 μ g/L Tri实 验 组 ， IL- 2R的 表 达 明 显 减 少 ， 与 对 照 组 相 比 较 差 異 显 著 (P< 0.01)(图 7， 见 第 Ⅴ 页 )。 2.10 Tri处 理 的 淋 巴 细 胞 对 外 源 rIL- 2的 反 应 性 实 验 结 果 表 明 ， 2 μ g/L和 10 μ g/L Tri处 理的 淋 巴 细 胞 ， 对 外 源 性 rIL- 2的 反 应 性 明 显 下 降 ， 与 对 照 组 相 比 较 差 異 显 著 (P 0.01)(图 8， 见 第 Ⅴ 页 )。 3 讨 论 Tri是 卫 矛 科 植 物 雷 公 藤 (TWH)的 提 取 成 分 ， 为 我 国 首 先 发 现 的 免 疫 调 节 药 物 。 Tri现 已 用 于 治 疗 类 风 湿 性 关 节 炎 、 系 统 性 红 斑 狼 疮 和 紫 癜 性 肾 炎 等 自 身 免 疫 性 疾 病 。 本 文 中 利 用 小 鼠 同 种 異 体 異 位 心 肌 移 植 模 型 ， 研 究 了 Tri在 抗 排異 反 应 中 的 作 用 。 结 果 显 示 ， Tri对 移 植 心 肌 的 存 活 期 具 有 明 显 地 延 长 作 用 。 其 抗 排 斥 反 应 的 效 果 与 给 药 剂 量 和 给 药 时 间 有 关 。 术 前 给 予 Tri者 无 抗 排 斥 反 应 的 作 用 。 其 抗 排 斥 反 应 的 作 用 发 生排 異 反 应 期 间 ， 作 用 方 式 可 能 为 直 接 抑 制 排 斥 反 应 或 者 减 轻 排 斥 反 应 的 严 重 程 度 。 细 胞 免 疫 在 同 种 異 体 移 植 物 排 斥 反 应 中 起 着 决 定 性 的 作 用 ， 病 理 反 应 主 要 是 由 于 相 应 抗 原 激 活 的 T淋 巴 细 胞 增 殖 并 向 病 灶 聚 集 ， 以 及 释 放 细 胞 活 性 因 子 所 致 。 检 测 T淋 巴 细 胞 功 能 最 常 用 的 方 法 是 ， 用 非 特 異 性 激 活 剂 (如 Con A)和 特 異 性 激 活 剂 (如 MHC抗 原 )， 激 活 细 胞 DNA合 成 的 细 胞 增 殖 实 验 。 本 研 究 结 果 表 明 ， Tri对 LT和 MLR均 有 明 显 地 抑 制 作 用 ， 而 且 作 用 的 强 度 与 用 药 剂 量 和 时 间 相 关 。 Tri在 0.04 μ g/L～ 10 μ g/L范 围 内 ， 对 LT均 有 抑 制 作 用 ； 在 0.2 μ g/L～10 μ g/L范 围 内 ， 对 MLR有 抑 制 作 用 ， 且 随 着 Tri浓 度 的 增 加 ， 抑 制 作 用 增 强 。 在 细 胞 培 养 12 h加 入 Tri， 產 生 的 抑 制 作 用 最 强 ； 在 培 养 24 h和 36 h给 予 Tri， 则 抑 制 作 用 减 弱 ； 而 48 h和 48 h以 後 加 入 Tri， 对 LT和 MLR均 无 明 显 抑 制 作 用 。 上 述 结 果 对 进 一 步 从 细 胞 及 分 子 水 平 上 ， 探 讨 Tri免 疫 抑 制 作 用 的 机 制 奠 定 了 良 好 的 基 础。 同 种 移 植 物 的 排 斥 反 应 主 要 由 T淋 巴 细 胞 所 介 导 。 病 理 反 应 主 要 由 相 应 抗 原 激 活 的 T细 胞 集 聚 于 移 植 物 ， 并 释 放 细 胞 活 性 因 子 而 引 起 〔 2， 3〕 。 T细 胞 受 体 对 抗 原 的 识 別 决 定 了 免 疫 反 应 的 特 異 性 ， 而 IL- 2与 高 亲 和 性 IL- 2R的 结 合 ， 则 决 定 着 该 免 疫 反 应 的 强 度 和 持 续 时 间 〔 4〕 。 本 实 验 结 果 表 明 ， 不 同 浓 度 的 Tri对 Con A诱 导 的 小 鼠 脾 淋 巴 细 胞 合 成 和 分 泌 IL- 2没 有 明 显 地 影 响 。 但 对 Con A诱 导 的 小 鼠 脾 淋 巴 细 胞 表 达 IL- 2R却 有 明 显 地 抑 制 作 用 ， 且 随 着 Tri浓 度 的 增 加 ， 小 鼠 脾 淋 巴 细 胞 中 IL- 2R＋ 的 细 胞 数 呈 递 减 趋 势 (10 μ g/L Tri组 较 对 照 组 下 降 50％ 以 上 )。 同 时 ， 经 2 μ g/L和 10 μ g/L Tri处 理 後 的 小 鼠 脾 淋 巴 细 胞 ， 对 外 源 性 IL- 2的 反 应 性 ， 较 未 经 Tri处 理 组 降 低 50％ 以 上 。 由 上 述 结 果 推 测 ， Tri的 抗 排 斥 效 应 ， 可 能 主 要 是 通 过 抑 制 IL- 2R的 表 达 ， 影 响 IL- 2与 IL- 2R的 结 合 ， 而 抑 制 淋 巴 细 胞 的 增 殖 。 Tri是 否 还 可 干 扰 细 胞内 的 信 号 传 递 ， TCR和 IL- 2R基 因 的 表 达 ， 以 及 转 录 调 控 等 ？ 尚 需 做 进 一 步 的 研 究 证 实 。 但 上 述 实 验 表 明 ， Tri可 望 成 为 一 种 有 效 的 免 疫 抑 制 剂 ， 用 于 临 床 抗 同 种 移 植 排 斥 反 应 的 辅 助 治 疗 。 参 考 文 献 1 Fulmer RI, Cramer AT, Libelt RA, et al. Transplantation of cardiac tissue into the mouse ear. Am J Anat, 1963; 113: 273～ 278 2 Waldmann TA. The structure, function and expression of interleukin 2 receptors on normal and malignant lymphocytes. Science, 1986: 232: 727～ 732 3 Robb RJ. The interleukin 2 receptor. J Biol Chem, 1991; 266: 2681～ 2684 4 Waldmann TA. The multi subunit interleukin 2 receptor. Ann Rev Biochem, 1989; 58:875～ 911 (收 稿 1998－ 09－ 17 修 回 1998－ 12－ 07)
|
